手術室內較為合適的相對濕度為 40%~60%。據研究，相對濕度50%時，細菌浮游 10min 后即死滅；相對濕度更高或更低時，即使經過24h大部分細菌還活著。在常溫下，φ=60%以上時發霉，φ=80%以上則不論溫度高低都要發霉。當相對濕度超過 65%，手術部位感染率風險就增加，這成為手術室相對濕度控制的上限值。至于相對濕度下限值引起的討論，是因為近年來研究與大量實例說明空調系統加濕會引起室內人員感染發燒，也加大了手術部位感染風險。降低室內相對濕度控制下限值以減少系統加濕時間，是一項有效措施。基于最新科研成果，美國加州建筑設施法規首先提出將醫院中病人短時診療的科室，如手術室、內窺診療室、治療室等，將相對濕度控制下限值放寬到20%。由于現代靜電控制技術完全可以不再依賴室內的相對濕度，而且科研成果也證明低濕度并未增加手術部位感染風險。為此美國ASHRAE170 標準頒布修訂案D將原相對濕度 30%~60%修改為 20%~60%；俄國標準只提相對濕度最小為30%；瑞典標準手術室均為 20%~65%；法國標準為45%~65%；日本標準 2004 版規定夏季均為50%，冬季均為55%；美國退伍軍人醫院標準仍定為45%~55%。總之，手術室相濕度范圍冬季可低到20%，高到55%，而夏季低到55%，高到65%。

2002版《規范》相對濕度將I、II級的定為40%~60%，III、V級的定為35~60%。傳統理念主要因為低于30%的相對濕度會引起靜電和切口干燥，此次修訂后《規范》既考慮到現有靜電防護技術水平，也考慮到仍有一些手術室內靜電控制并非良好相對濕度低于 30%會出現有起靜電的現象，在許多醫院中也屢見不鮮。因此《規范》將手術室相對濕度一律定為30%~60%，對一些輔助用房更降低為25%，上限取到 65%。

關于溫、濕度不達標的天數的規定:

1)考慮到節能要求，不因為了保證全年幾天(實質幾個小時)的特殊氣候條件下手術室正常運行，盲目加大手術室冷熱源容量。本《規范》規定了不達標時間。德國標準DIN1946也明確規定“一年中只允許有幾天的時間出現實際值高于或低于規定的溫度或相對濕度”。

2) 至于溫濕度允許超標天數的要求，是指不允許連續 2 天 (不是指連續 48小時，是指在兩天的使用時間中)不達標。如果用房出現連續 2 天在手術室使用期間溫濕度不達標，需要對系統從設計、施工到運行進行檢查、排除問題。需要指出，設計時仍然是參照《民用建筑供暖通風與空調設計規范》，選取室外設計參數，該參數是按歷年平均不保證50小時確定的，與這里所說的連續 2 天并不矛盾。