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宜賓無菌室浮游菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作程序

發(fā)布時間:2023-06-17 21:40:42 人氣:1422

無菌室浮游菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作程序無菌室浮游菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作程序

無菌室浮游菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作程序

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?

1??????????目的

建立無菌室浮游菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作程序,規(guī)范無菌室浮游菌的檢測。

2??????????范圍

適用于無菌室(包括潔凈工作臺)浮游菌的測試和環(huán)境驗證。

3??????????職責(zé)

QA、QC人員遵照執(zhí)行。

4??????????內(nèi)容

4.1????參考標(biāo)準(zhǔn):GB/T 16293-2010

4.2????測試方法

本測試方法為計數(shù)濃度法,即通過收集懸浮在空氣中的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基(選擇能證實其能夠支持微生物生長的培養(yǎng)基),經(jīng)若干時間和適宜的生長條件讓其繁殖到可見的菌落計數(shù),以判定該無菌室的微生物濃度。

4.3????測試儀器、輔助設(shè)備和培養(yǎng)基

浮游菌采樣器、培養(yǎng)皿(選用與儀器相適應(yīng)的培養(yǎng)皿)、培養(yǎng)基、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器。

4.4????測試狀態(tài)及測試時間

4.4.1???靜態(tài)和動態(tài)兩種狀態(tài)均可進(jìn)行測試,靜態(tài)測試時,室內(nèi)測試人員不得多于2人。

4.4.2???在靜態(tài)a測試時,單向流無菌室(區(qū)),測試在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行時間不少于10分鐘后開始;非單向流無菌室(區(qū)),測試在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于30分鐘后開始。在靜態(tài)b測試時,單向流無菌室(區(qū)),測試在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過10分鐘自凈后開始;非單向流無菌室(區(qū)),測試在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過20分鐘自凈后開始。

4.5????采樣點的確定

4.5.1???最少采樣點數(shù)目見表1,每次最小采樣量見表2。

表1?最少采樣點數(shù)目

面積

m2

潔凈度級別

A級

B級(靜態(tài))

B級(動態(tài))及C級

D級

<10

2~3

2~3

2

2

≥10~<20

4

4

2

2

≥20~<40

8

8

2

2

≥40~<100

16

16

4

2

注:對于A級單向流無菌室(區(qū)),包括A級潔凈工作臺,面積指的是送風(fēng)口表面積;對于D級以上的非單向流無菌室(區(qū)),面積指的是房間面積。

?

表2?最小采樣量

潔凈度級別

采樣量(L/次)

A級

1000

B級(靜態(tài))

1000

B級動態(tài)及C級

500

D級

100

?

4.5.2???采樣點位置布置宜力求均勻,避免采樣點在局部區(qū)域過于稀疏,采樣點按照《潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控管理規(guī)程》附件×××車間潔凈度監(jiān)測采樣點布局圖的要求布置,每個采樣點一般采樣一次。

4.5.3???工作區(qū)采樣點位置離地0.8m~1.5m左右(略高于工作面),送風(fēng)口測點位置離開送風(fēng)面30cm左右,可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點。

4.6????測試準(zhǔn)備

4.6.1???采樣器在進(jìn)入被測區(qū)域前先清潔表面,然后用75%酒精消毒一遍或存放于被測區(qū)域內(nèi),與被測試區(qū)域一起消毒(用于A級無菌室的采樣器必須預(yù)先放在被測房間內(nèi))。

4.6.2???A/B級區(qū)采用一次性培養(yǎng)皿,其它區(qū)域按無菌操作要求,在中檢室潔凈工作臺上提前制備培養(yǎng)備用(將滅菌后的培養(yǎng)基用水浴溶解,冷卻至約50-60℃,Φ90mm培養(yǎng)皿每個傾注約20ml培養(yǎng)基,Φ150mm培每個傾注約30ml培養(yǎng)基),培養(yǎng)皿加蓋后在室溫下放至凝固。自制好的培養(yǎng)皿在無菌室內(nèi)存放不超過48小時,2~8℃保存的培養(yǎng)皿一般不超過1周,一次性培養(yǎng)皿在標(biāo)注的有效期內(nèi)使用,過期不得使用。

4.6.3???A/B級區(qū)使用的培養(yǎng)皿在區(qū)域消毒前一次性傳入,隨環(huán)境一起消毒,在消毒液取用間架子上暫存,在有效期內(nèi)使用。若需臨時傳入,則必須在前一天臭氧消毒前通過C級與B級傳遞窗傳入B級區(qū)進(jìn)行臭氧消毒,第二天使用。傳入前表面也必須用75%酒精擦拭。其它區(qū)域用培養(yǎng)皿按物品傳入要求當(dāng)天傳入使用。

4.6.4???采樣前,先用75%酒精清洗采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面(FKC型浮游空氣塵菌采樣器用酒精清洗采樣頭)。

4.6.5???測試具體操作見“JYQ-Ⅱ型浮游菌采樣器標(biāo)準(zhǔn)操作程序或FKC-1型浮游空氣塵菌采樣器標(biāo)準(zhǔn)操作程序”。

4.6.6???采樣結(jié)束后,蓋上培養(yǎng)皿蓋子,在培養(yǎng)皿上標(biāo)注所有信息(包括產(chǎn)品批號,放置位置等),將培養(yǎng)皿用適宜的方式捆扎,倒置于30~35℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)時間不少于2天。

4.6.7???培養(yǎng)結(jié)束后逐個檢查培養(yǎng)皿,用肉眼對培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計數(shù)、標(biāo)記,然后用5~10倍放大鏡檢查,有否遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊,可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。

4.7????測試記錄應(yīng)包含以下內(nèi)容

4.7.1 ?被測試區(qū)域名稱、測試日期、測試依據(jù)、測試者姓名、測試儀器及測試方法的描述,測試時所采用的狀態(tài)和室內(nèi)測試人員數(shù),采樣點數(shù)目,測試次數(shù)、采樣流量,測試結(jié)果(包括所有統(tǒng)計計算資料)等。

4.7.2 ?若為動態(tài)測試,還應(yīng)記錄現(xiàn)場操作人員數(shù)量,現(xiàn)場設(shè)備運轉(zhuǎn)情況等。

4.8????結(jié)果計算

4.8.1???用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。

4.8.2???每個測點的浮游菌平均濃度計算按下式進(jìn)行


4.9????結(jié)果評定

4.9.1???每個測點的浮游菌平均濃度必須低于所選定評定標(biāo)準(zhǔn)中的界限。

4.9.2???在靜態(tài)測試時,若某測點的浮游菌平均菌濃度超過評定標(biāo)準(zhǔn),則應(yīng)重新采樣兩次,兩次測試結(jié)果均合格才能判為符合。

4.9.3???若有超過規(guī)定者,必須及時與生產(chǎn)部門聯(lián)系,對該區(qū)域進(jìn)行消毒或其它處理,然后重新測試至合格。

4.10?日常監(jiān)控

4.10.1 ?浮游菌日常監(jiān)控設(shè)糾偏限度和警戒限度(限度范圍及取樣頻次見《潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控管理規(guī)程》),以保證無菌室(區(qū))的微生物濃度受到控制,定期檢測以檢查微生物負(fù)荷以及消毒劑的效力,并作傾向分析。靜態(tài)和動態(tài)的監(jiān)控都可以采用該方法。

4.10.2 ?對于浮游菌的取樣頻次,如果出現(xiàn)下列情況應(yīng)考慮修改,在評估以下情況后,也應(yīng)確定其他項目的檢測頻次

——連續(xù)超過糾偏限度和警戒限度;

——停工時間比預(yù)計延長;

——關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)有污染存在;

——在生產(chǎn)期間,空氣凈化系統(tǒng)進(jìn)行任何重大的維修;

——日常操作記錄反映出傾向性的數(shù)據(jù);

——消毒規(guī)程的改變;

——引起生物污染的事故等;

——當(dāng)生產(chǎn)設(shè)備有重大維修或增加設(shè)備時;

——當(dāng)無菌室(區(qū))結(jié)構(gòu)或區(qū)域分布有重大變動時。

4.11?注意事項

4.11.1?????JYQ-Ⅱ型浮游菌采樣器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿,開啟浮游菌采樣器,使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā),時間不少于5分鐘,檢查流量并根據(jù)采樣量調(diào)整設(shè)定采樣時間。

4.11.2?????單向流無菌室(區(qū))或送風(fēng)口,采樣器采樣口朝向應(yīng)正對氣流方向,非單向流無菌室(區(qū)),采樣口向上。

4.11.3?????測試時必須穿著與被測區(qū)域潔凈度級別要求相適應(yīng)并經(jīng)高壓滅菌后的無菌服。

4.11.4?????布置采樣點時,至少應(yīng)盡量避開塵粒較集中的回風(fēng)口。

4.11.5?????采樣結(jié)束,需用75%酒精噴射采樣器罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤(FKC型浮游空氣塵菌采樣器噴射采樣頭和保護(hù)蓋)。

4.11.6?????應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。

4.11.7?????每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗,檢驗培養(yǎng)基本身是否污染,可每批選定3只培養(yǎng)皿作為對照培養(yǎng);培養(yǎng)皿在用于檢測時,為避免培養(yǎng)皿運輸或搬動過程造成的影響,宜同時進(jìn)行對照試驗,每次或每個區(qū)域取1個對照皿,與采樣皿同法操作但不需暴露采樣,然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果應(yīng)無菌落生長。

4.11.8?????采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量,如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。

4.11.9?????由于細(xì)菌種類繁多,差別甚大,計數(shù)時一般用透射光于于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察,不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落,并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別,必要時用顯微鏡鑒別。

4.11.10??必須定期對恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行校驗。

5??????????相關(guān)文件

6??????????附件

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