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遂寧無菌室浮游菌測試操作規程

發布時間:2023-06-18 21:40:50 人氣:1681

無菌室浮游菌測試操作規程無菌室浮游菌測試操作規程

無菌室浮游菌測試操作規程



1? 范圍:


? ??本標準規定了醫藥工業無菌室和潔凈區中浮游菌的測試條件和測試方法。

? ??本標準適用于醫藥工業無菌室和潔凈區,無菌室或局部空氣凈化區域(包括潔凈工作臺)的浮游菌的測試和環境的驗證。


2? 引用標準:GB/T 16293.2010


??? 藥品生產管理規范(1998修訂)附錄。


3? 標準


潔凈度級別

活微生物數/ m3

100

5

10000

100

100000

500


4? 測試方法


4.1? 方法提要

本標本采用的方法是計數濃度法。即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門的培養基(選擇能證實其能夠支持微生物生長的培養基),經若干時間和適宜的生長條件下讓其繁殖到可見菌落計數,以判定該潔室的微生物濃度。


4.2人員的職責及培訓

無菌室的測試人員應進行本專業的培訓并獲得相應的資格后才能才能履行對無菌室測試的職責,其中包含涉及的衛生知識和基本的微生物知識。

無菌室的測試人員應選擇與生產操作的空氣潔凈度級別要求相適應的穿戴方式,外面的衣服不能帶進100000級以上的區域。


4.3? 儀器、輔助設備和培養基

選擇合適的浮游菌采樣器,包括采用無油的抽氣泵,較低的氣流流速和較大的采樣流量,以保證培養基表面的水分布被吹干。

本測試需要具備儀器、輔助設備和培養基如下:

a) 浮游菌采樣器;

b) 培養皿;

c) 高壓消毒鍋;

d) 培養基;

e) 恒溫培養箱;??


4.4? 浮游菌采樣器原理

浮游菌采樣器一般采用撞擊法機理,可分為夾縫式采樣器、離心式或針孔式采樣器。夾縫式采樣器由內部風機將氣流吸入,通過采樣器的夾縫式平板,將采集空氣噴射并撞擊到緩慢的平板培養基表面,附著的活微生物粒子經培養后形成菌落。離心式采樣器由于內部風機的高速旋轉,氣流從才樣器的前部進入后部流出,在離心力的作用下,空氣中的活微生物粒子有足夠的時間撞擊到專用的固型培養條上,附著活的微生物粒子經培養后形成菌落。針孔式采樣器是氣流通過一個金屬蓋吸入,蓋子上是密集的經過機械加工的特制小孔,通過風機將收集到的細小的空氣直接撞擊到平板培養基表面,附著的活物微生物粒子經培養成型后形成菌落。


4.5? 測試要點

4.5.1? 必須按照儀器的檢定周期,定期對測試儀器作檢定。應使用檢定合格,并且使用有效期內的儀器。

4.5.2? 測試儀器未進入被測區域時,若必需,則先清洗表面吧,或在相應的無菌室內準備和存放(用保護罩或其他適當地外罩保護儀器)。

4.5.3? 100級無菌室內用紙時,上面應蒙上一張透明不沾塵的覆蓋物,在100級的無菌室內不能用鉛筆的橡皮。

4.5.4? 使用測試儀器時應嚴格按照說明書操作。

4.5.4.1? 儀器開機,預熱到穩定后,方可按說明書的規定對儀器進行校正,同時檢查采樣流量,并根據采樣量設定時間。

4.5.4.2?? 采樣口必須用使用便于消毒及化學性能穩定的材料制造。

4.5.4.3? 采樣管嚴禁滲漏,內壁應光滑。

4.5.4.4?? 采樣管的長度應根據測點的高度定,盡量減少彎曲。


4.6?? 培養皿

4.6.1? 一般采用φ90mm×15mm規格的培養皿。可根據所選用采樣器選擇合適的培養皿。

4.6.2離心式采樣器采用專用的固型培養條


4.7? 培養基

???? 大豆酪蛋白瓊脂培養基(TSA)或沙氏培養基(SDA)或其他用戶認可并經驗證的培養基。


4.8 恒溫培養箱

??? 必須定期對恒溫培養箱進行效驗


4.9? 測試步驟;

4.9.1? 測試前儀器、培養皿表面必須嚴格消毒。

4.9.1.1? 采樣器進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌,用于100級無菌室的采樣器

宜預先放在被測房間內。

4.9.1.2? 用消毒劑擦凈培養皿的外表面。

4.9.1.3? 采樣前,先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉盤以及罩子的內外面,采樣結束,再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。

4.9.1.4? 采樣口及采樣管,使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內壁進行消毒時,應將管中的殘留液倒掉并晾干。

4.9.1.5? 采樣者應穿戴與被測潔凈區域相應的工作服,在轉盤上放入或調換培養皿前,雙手用消毒劑消毒或帶無菌手套操作。

4.9.1.6 采樣儀器經消毒后先不放入培養皿,開啟浮游菌采樣器,使儀器中的殘余消毒劑蒸發,時間不少于5min,并檢查流量并根據采樣量調整設定時間。

4.9.1.7 關閉浮游采樣器,放入培養皿,蓋上蓋子。

4.9.1.8 置采樣口于采樣點后,開啟浮游菌采樣器進行采樣。


4.10? 培養

4.10.1? 全部采樣結束后,將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。

4.10.2? 采用大豆酪蛋白瓊脂培養基(TSA)配制的培養經采樣后,在30℃35℃培養箱中培養,時間不得少于2d;采用沙氏培養基(SDA)配制的培養皿經采樣后,在20℃25℃培養箱中培養,時間不少于5d

4.10.3每批培養基應有對照試驗,檢驗培養基本身是否污染。可每批選定3只培養皿作對照培養。


4.11? 菌落計數

4.11.1? 用肉眼對培養皿上所有的菌落直接計數、標記或在菌落計數器上點計,然后用510倍放大鏡檢查,有否遺漏。

4.11.2? 若平板上有2個或2個以上的菌落重疊,可分辯時仍以2個或2個以上菌落計數。


4.12? 注意事項

4.12.1 使用前應仔細檢查每個培養皿質量,培養基及培養皿有變質、破損或污染的不能用使用的。

4.12.2 對培養基、培養條件及其他參數作詳細記錄。

4.12.3 由于細菌種類繁多,差別甚大,計數時一般用透射光于培養皿面或真面仔細觀察,不要有遺漏計培養皿邊緣生長的菌落,并須要菌菌落或培養基沉淀的物區別,必要時用顯微鏡鑒別。


5? 測試規則


5.1 測試條件

在測試之前要,要對無菌室相關參數進行預先測試,這類測試將會提供測試懸浮粒子的環境條件,例如:這種預先測試或可包括:

a)? 溫度和相對濕度的測試。? 無菌室的溫度和相對濕度應與其生產及工藝要求相適

應(無特殊要求時,溫度控制在18℃~26℃,相對濕度控制在45%65%之間為宜)。同時滿

足測試儀器的使用范圍;

b)? 室內送風量或風速的測試的測試,或壓差的測試;

c)? 高效過濾器的泄漏測試


5.2? 測試狀態

??? 靜態和動態兩種狀態均可進行測試。

靜態測試時,室內測試人員不得多于2

浮游菌測試前,被測定無菌室()由用戶決定是否需要預先消毒.

??? 浮游菌測試時應標明測試時所采用的狀態和室內測試人員數。


5.3? 測試時間

5.3.1? 在空態或靜態a測試時,對單向流無菌室而言,測試宜在凈化空氣調節系統正常運行時間不少于10min后開始。對非單向流無菌室,測試宜在凈化系統正常運行時間不少于30min后開始。在靜態b測試時,對單向流潔凈是(區),測試宜在生產操作人員撤離現場并經過10min自凈后開始;;對非單向無菌室,測試宜在生產操作人員撤離現場并經過20min自凈后開始。

5.3.2? 在動態測試時,則須記錄生產開始的時間以及測試時間。


5.4.浮游菌濃度的計算

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