洁净实验室工程-成都手术室净化-无尘车间装修-四川华锐净化公司-洁净室专业厂家

2009年至今十余年行業經驗
全國咨詢熱線:18980800355

攀枝花建立PCP實驗室要注意的八大項

發布時間:2023-03-19 21:30:31 人氣:9386

建立PCP實驗室要注意的八大項建立PCP實驗室要注意的八大項

建立PCP實驗室必須要知道以下八大項。為了對以個特定序列進行PCR做重復檢測,需要三個不同的區域,每一個區域的具體技術操作和試劑在下面詳細列出。 1、樣品準備區 這個區域專門用


  建立PCP實驗室必須要知道以下八大項。為了對以個特定序列進行PCR做重復檢測,需要三個不同的區域,每一個區域的具體技術操作和試劑在下面詳細列出。

?

  1、樣品準備區

?

  這個區域專門用作樣品的準備,在制備和操作用于核酸提取的試劑時應該采取預防措施:

?

  1)PCR產物和帶有要擴增序列的DNA克隆不能在這個房間操作。

?

  2)組織培養物、組織標本和血清樣品都帶進樣品準備間處理,以根據應用的需要提取DNA或RNA。

?

  3)用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具,也不能用作操作靶序列。

?

  4)DNA樣品應該用有專門的防護或正壓活塞式移液管操作,以防止在吸取樣品時有氣溶膠遺留。

?

  5)大體積樣品應該用單獨包裝的無菌一次性移液管吸取。

?

  6)管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產生,而且管子不能用力崩開,這樣會產生氣溶膠。

?

  7)任何時候都應該穿實驗服和帶手套,手套要經常更換,尤其在抽提過程中每一步之間都要更換。實驗服要專門用于樣品準備間,經常清洗。

?

  2、樣品準備和RNA-PCR

?

  RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題,反轉錄一步可以在樣品準備區進行。在RNA-PCR中應用UNG以防止污染的方法也有報道。

?

  3、前PCR區

?

  必須有專門用于準備各種反應的區域,這個區域必須保持干凈,而且沒有來自克隆和樣品準備的污染。前PCR區必須要有試劑和準備,特別是專門用于前PCR區的正壓活塞式移液管。

?

  4、PCR實驗室試劑的操作

?

  1)所用的所有溶液都應該沒有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。

?

  2)所有PCR試劑中使用的水都應該是高質量的——新鮮蒸餾的去離子水,用0.22μm過濾的,并且是高壓滅菌。

?

  3)在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑,在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應。

?

  4)所用試劑都應該以大體積配制,實驗一下看試劑是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。

?

  5)所有試劑和樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。

?

  6)新配制的試劑在用于準備新的標本之前應該加以檢驗。

?

  7)樣品準備和前PCR區所使用的移液管在不使用時都應該小心保存。

?

  5、在前PCR區建立PCR混合物

?

  1)可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃,在實驗室只涉及到擴增一種或少數幾種特異序列時這樣做很有用。

?

  2)如果你的實驗室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應混合物不夠經濟,可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。

?

  3)作為一個規則,應該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且,你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增抑制物。

?

  4)陰性樣品要與每組樣品同時做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產物的污染,陰性對照應該包括核酸以外的所有試劑。

?

  5)當做陽性對照時,有兩個理由決定了應該使用最少數量的核酸。

?

  6)由于必須有對照反應,對照模板的特點應該予以考慮。

?

  6、控制污染的方法

?

  已設計出很有力的酶學方法用來消除一種形式的污染?使用UNG,這一技術能有效地消除由PCR產物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線,這種方法不能完全消除污染問題,但可以將污染降低幾個數量級。

?

  7、PCR儀的位置

?

  8、后PCR區

?

  以上,PCR完成以后,需要分析樣品并解釋數據,應該留出一個專門用于反應后處理樣品的地方。后PCR活動中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用于這一目的,決不能把實驗室這一區域的試劑或儀器用于任何前PCR活動。


    在線客服
    聯系方式

    熱線電話

    18980800355

    上班時間

    周一到周五

    公司電話

    18980800355

    二維碼
    主站蜘蛛池模板: B2B网站_B2B免费发布信息网站_B2B企业贸易平台 - 企资网 | 高光谱相机-近红外高光谱相机厂家-高光谱成像仪-SINESPEC 赛斯拜克 | QQ房产导航-免费收录优秀房地产网站_房地产信息网 | 转向助力泵/水泵/发电机皮带轮生产厂家-锦州华一精工有限公司 | 校服厂家,英伦校服定做工厂,园服生产定制厂商-东莞市艾咪天使校服 | 知网论文检测系统入口_论文查重免费查重_中国知网论文查询_学术不端检测系统 | IHDW_TOSOKU_NEMICON_EHDW系列电子手轮,HC1系列电子手轮-上海莆林电子设备有限公司 | 一体化污水处理设备_生活污水处理设备_全自动加药装置厂家-明基环保 | 东莞螺丝|东莞螺丝厂|东莞不锈钢螺丝|东莞组合螺丝|东莞精密螺丝厂家-东莞利浩五金专业紧固件厂家 | 电采暖锅炉_超低温空气源热泵_空气源热水器-鑫鲁禹电锅炉空气能热泵厂家 | 衢州装饰公司|装潢公司|办公楼装修|排屋装修|别墅装修-衢州佳盛装饰 | 工业胀紧套_万向节联轴器_链条-规格齐全-型号选购-非标订做-厂家批发价格-上海乙谛精密机械有限公司 | 聚天冬氨酸,亚氨基二琥珀酸四钠,PASP,IDS - 远联化工 | 西安标准厂房_陕西工业厂房_西咸新区独栋厂房_长信科技产业园官方网站 | 结晶点测定仪-润滑脂滴点测定仪-大连煜烁 | 骁龙云呼电销防封号系统-axb电销平台-外呼稳定『免费试用』 | 北京网站建设公司_北京网站制作公司_北京网站设计公司-北京爱品特网站建站公司 | 手持气象站_便携式气象站_农业气象站_负氧离子监测站-山东万象环境 | 蜜蜂职场文库_职场求职面试实用的范文资料大全 | 流程管理|流程管理软件|企业流程管理|微宏科技-AlphaFlow_流程管理系统软件服务商 | 压片机_高速_单冲_双层_花篮式_多功能旋转压片机-上海天九压片机厂家 | 祝融环境-地源热泵多恒系统高新技术企业,舒适生活环境缔造者! | 卫生纸复卷机|抽纸机|卫生纸加工设备|做卫生纸机器|小型卫生纸加工需要什么设备|卫生纸机器设备多少钱一台|许昌恒源纸品机械有限公司 | 涂层测厚仪_光泽度仪_uv能量计_紫外辐照计_太阳膜测试仪_透光率仪-林上科技 | 上海APP开发-APP制作-APP定制开发-上海APP开发制作公司-咏熠科技 | 学校用栓剂模,玻璃瓶轧盖钳,小型安瓿熔封机,实验室安瓿熔封机-长沙中亚制药设备有限公司 | 安驭邦官网-双向万能直角铣头,加工中心侧铣头,角度头[厂家直销] 闸阀_截止阀_止回阀「生产厂家」-上海卡比阀门有限公司 | TwistDx恒温扩增-RAA等温-Jackson抗体-默瑞(上海)生物科技有限公司 | 400电话_400电话申请_866元/年_【400电话官方业务办理】-俏号网 3dmax渲染-效果图渲染-影视动画渲染-北京快渲科技有限公司 | 台式低速离心机-脱泡离心机-菌种摇床-常州市万丰仪器制造有限公司 | 浇注料-高铝砖耐火砖-郑州凯瑞得窑炉耐火材料有限公司 | 搅拌磨|搅拌球磨机|循环磨|循环球磨机-无锡市少宏粉体科技有限公司 | 达利园物流科技集团-| 搪玻璃冷凝器_厂家-越宏化工设备 | 上海平衡机-单面卧式动平衡机-万向节动平衡机-圈带动平衡机厂家-上海申岢动平衡机制造有限公司 | 楼梯定制_楼梯设计施工厂家_楼梯扶手安装制作-北京凌步楼梯 | 济南网站建设_济南网站制作_济南网站设计_济南网站建设公司_富库网络旗下模易宝_模板建站 | 最新范文网_实用的精品范文美文网| 全温度恒温培养摇床-大容量-立式-远红外二氧化碳培养箱|南荣百科 | 量子管通环-自清洗过滤器-全自动反冲洗过滤器-沼河浸过滤器 | 招商帮-一站式网络营销服务|搜索营销推广|信息流推广|短视视频营销推广|互联网整合营销|网络推广代运营|招商帮企业招商好帮手 |